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(J. Agric. Food Chem.)|探究S-亚硝基化对Caspase-3修饰和肌纤维蛋白降解的影响

发布时间:2024-11-15
肉的宰后嫩化要点归因于肌原弹性黏胶纤维棉构造的受到破坏,肌原弹性黏胶纤维棉构造是由内源性血清淀粉电离酶溶解肌原弹性黏胶纤维棉和体组织骨架血清带来的。与一百多年来一直以来都是特别关注端点的钙血清酶各个,胱天血清酶(caspases)这段时间成了感关注得话题。胱天血清酶在体组织凋亡的执行命令阶段中,起着至关要点的角色,在这当中caspase-3在死去血清淀粉电离中的角色是相互面和简化的,所以说非常值得进十步的研究分析方案。S-亚硝基化根据自动的控制钙释放出来、激光能量分解、血清质溶解和体组织凋亡来自动的控制肉嫩,以及嫩度和持水实力。中后期的研究分析方案发现S-亚硝基化可以调低依赖感线粒体的caspase-3级联作用,这很有可能是力量体组织凋亡和鸡肉高质量不同的主要原因。caspase-3的的研究分析方案要点是其与体组织凋亡的内在联系,其实,较少有的研究分析方案研究S-亚硝基化自动的控制caspase-3的考核机制。

2024年9月由扬州农牧业高中张万刚专家团队图片在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章,研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低(P < 0.05),并表现出剂量依赖性的抑制作用,其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化,进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱动物为该研究提供了亚硝基化表达组学拜谱生物,助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文名字子标题:体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

中文核心期刊:Journal of Agricultural and Food Chemistry

202多年决定要素:5.7

先生发表时间段:2024年9月

大家企业:南京农业大学

深入分析相关材料:蛋白

拜谱可以提供能力:亚硝基化修饰组学

工艺风格:

一、理论研究结果显示

01.Caspase-3活力

当今尚不看清楚NO对caspase-3的克制作方法用是归因于NO介导的S-亚硝基化,各种不同溶度梯度方向的GSNO对于外源性NO供应商,以引发caspase-3的身体之外S-亚硝基化。没想到证实,与不GSNO的组对比,100、200和400μM GSNO组的caspase-3几丁质酶可观缩减(图1),与此前通讯报道同步。GSNO处理缩减caspase-3几丁质酶的不确定的原因仍有待于体现了。

图1 其他质量浓度的GSNO处里对caspase-3可溶性的导致

(图源:Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化度

科研Caspase-3的亚硝基化度,以确立GSNO对Caspase-3的现象性。经GSNO除理后,监测到caspase-3蛋清S-亚硝基化抗弯强度扩大(图2)。这样最后表面,外源性GSNO训练可完美促进caspase-3的身体外S-亚硝基化。使人难以相信的是,在没GSNO出现的相较比较组中监测到一两个绚烂的S-亚硝基化带,这表面caspase-3可能会有内源性的S-亚硝基化。除外,本科研中caspase-3的S-亚硝基化度较高,而caspase-3的化学活化减低,这与时候的科研不同。以至于,caspase-3的特喜欢的人S-亚硝基化呈现位点尚不非常清楚,还要求进的一步的找寻。

图2 GSNO清理对caspase-3S-亚硝基化平均水平的危害

(图源:Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化淡化组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明,caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰(图3)。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中,分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶,其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化,说明Caspase-3易受亚硝基化修饰(图4)。此外,据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163,这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断,半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的,这可能影响蛋白降解,促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码回文序列。粉色符号的编码回文序列表现S-亚硝基化肽,大红色符号的C表现S-亚硝基化半胱氨酸

(图源:Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源:Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3溶解结淀粉酶

结核血清有所作为那种关键性的生殖细胞系骨架核血清,在能维持肌生殖细胞系形式特征的形式特征系统的性和弯曲性方位起着关键性重大意义,论述S-亚硝基化caspase-3对结核血清可降解塑料的皮肤辨别力的兼有关键性重大意义。与Std(未用胱天核血清酶-3和GSNO孵育的初始值肌棉纤维板核血清)组不同于,0 μM GSNO组(肌原棉纤维板和caspase-3的孵育,无GSNO)的系统的结核血清含氧量正相关较低,呈现caspase-3对结核血清兼有风险的核血清溶解特性。在GSNO孵育后,系统的结核血清的含氧量明星加剧(P < 0.05)。然而,当GSNO氧化还原电位提高时,系统的结核血清的含氧量不间断上浮(P < 0.05)(图5)。一种找到呈现,SNO遮盖的caspase-3以情况依赖感的的方式抑制性结核血清的可降解塑料。

图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结蛋白质

(图源:Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3化学降解肌钙淀粉酶-T

肌钙血清质-T (TnT)是原肌球血清质改善否则背部肌肉回缩的细细的的一定肌原化学人造人造纤维血清质。TnT的挥发表现是监测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化条件下,caspase-3对TnT的挥出现 状就像文中6如下图所示,与Std组(不标caspase-3和GSNO的肌原化学人造人造纤维)好于,caspase-3组中30 kDa TnT细节描写相关系数增大,呈现caspase-3确认了TnT的挥发,还有,caspase-3与GSNO的孵育形成30 kDa TnT走低。在100和200 μM GSNO组范围内就没有监测到比较突出的相互导致(P > 0.05),而当GSNO的渗透压以达到400 μM 时,该细节描写相关系数极大减少(P < 0.05)。他们出现 呈现了SNO呈现的caspase-3对TnT挥发的阻止意义。结血清质和TnT是caspase-3的特别敏感底物,而GSNO治理 缩减caspase-3的活性酶类氧几率形成肌原化学人造人造纤维血清质挥发层度缩减。笔者认为说明,NO成脂的S-亚硝基化能够 确认呈现半胱氨酸残基来改善caspase-3的活性酶类氧,而能进1步导致其对结血清质和TnT的血清质蛋白质水解意识,为了导致羊肉质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3生物降解肌钙蛋清-T

(图源:Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、工作小结

本论述目的在于论述S-亚硝基化对caspase-3突显的不良应响以及其自后对牛羊肉肌原纤维素棉休外光降解的不良应响。球血清酶S-亚硝基化可不可以突显caspase-3的半胱氨酸残基,若想造成caspase-3渗透性减轻,进两步能够抑制了其对牛羊肉肌原纤维素棉球血清酶的球血清酶淀粉水解力量。

三、拜谱总结

介绍选取了酶活查测,亚硝基化呈现组学介绍,WB等查测方式,察觉到核淀粉酶酶S-亚硝基化需要呈现caspase-3的半胱氨酸残基,这形成了caspase-3可溶性的拉低,并举十步可抑制了其对鸡肉肌原合成纤维核淀粉酶酶的核淀粉酶酶核氨基酸水解技能。本介绍为表达核淀粉酶酶质亚硝基化对吃起来的控制工作机制提供了了个新的视距。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司,可提供完善成熟的血清酶质组学、体现血清酶质组学、分泌组学、转录组学等多组学产品技术服务体系,整合多组学数据进行深入挖掘分析,全面解析机制机理等,助力高分文章发表。除此之外,拜谱生物还可提供半胱氨酸款型好产品,包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺酸性反应、total空气氧化恢复、分散巯基,欢迎大家咨询!

关联性资料:

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663
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